微孔防水透气膜在实验分(fēn)析中的应用(yòng)

创承科(kē)技 2018-09-19

生物(wù)化學(xué)中很(hěn)多(duō)实验操作是把一种物(wù)质和另一些物(wù)质分(fēn)开,最常用(yòng)的有(yǒu)各种离心、電(diàn)泳、层析等方法,而过滤法是一种古老但仍常用(yòng)的分(fēn)离技术。近十多(duō)年来发展了具有(yǒu)不同孔径的微孔滤膜(0.1~10μm)和超过滤膜(约6~36nm),使过滤技术进人了亚细胞水平和分(fēn)子水平,成為(wèi)分(fēn)子生物(wù)學(xué)工作者所采用(yòng)的一种很(hěn)简单, 但又(yòu)是十分(fēn)重要的技术。


       微孔滤膜可(kě)以根据它的孔径大小(xiǎo)不同而用(yòng)于收集各种不同大小(xiǎo)粒子,在进行细胞和细胞器的研究工作中,一般称為(wèi)绝对过滤。很(hěn)多(duō)厂商(shāng)供应的微孔滤膜就是根据生物(wù)样品的大小(xiǎo)制造的。在应用(yòng)微孔滤膜技术的过程中,人们发现纤维素酯型微孔滤膜还具有(yǒu)一种特殊的吸附性质,这种吸附性质使纤维素酯型微孔滤膜能(néng)结合一些生物(wù)高分(fēn)子,而这些生物(wù)高分(fēn)子实际上要比微孔滤膜的孔径小(xiǎo)得多(duō),按绝对过滤的概念是不可(kě)能(néng)被微孔滤膜表面所截留住的。根据纤维素酿型微孔滤膜的这种吸附性质建立了许多(duō)结合测定法,為(wèi)现代生化分(fēn)析技术做出了重要的贡献,在分(fēn)子生物(wù)學(xué)中应用(yòng)极為(wèi)广泛。
 



        EPTFE微孔滤膜过滤技术在生物(wù)化學(xué)方面的应用(yòng)有(yǒu)下列几个优点。

        ①方法简单,只要根据工作需要选择种合适的微孔滤膜和采用(yòng)一般的吸滤装置,不需要其他(tā)的特殊仪器。

        ②使用(yòng)方便,重复性好,全部操作(由收集样品、分(fēn)离、洗涤、干燥、直到最后鉴定和定量)在同一片均匀的微孔滤膜的表面上进行,这样不存在丙样品转移而引起的损失导致结果偏低;也不会由于洗涤不充分(fēn)导致结果偏高,所以重复性好。

        ③快速,收集有(yǒu)样品的微孔滤膜可(kě)以很(hěn)快地充分(fēn)洗涤。而用(yòng)经典的离心法收集沉淀和洗涤,不但操作繁琐而目要花(huā)费很(hěn)多(duō)时间。特别应用(yòng)多(duō)支管的过滤装置可(kě)以同时进行几十个样品的过滤。 另一方面,单个样品的收集和洗涤,能(néng)在几秒(miǎo)钟内完成,适用(yòng)于研究小(xiǎo)分(fēn)子快速转移的动力學(xué)过程。


        如前所述,各种孔径的网状型微孔滤膜是根据生物(wù)样品的大小(xiǎo)制造的。收集的沉淀粒子非常小(xiǎo),很(hěn)多(duō)是肉眼看不到的。例如酵母菌用(yòng)1. 2μm的微孔滤膜可(kě)以完全收集到,大肠杆菌则需用(yòng)0.45μm的微孔滤膜来收集。从理(lǐ)论上讲,这类收集是绝对收集,不像深层型滤纸过滤时可(kě)能(néng)漏过1%~2%,但实际上往往并不是那么绝对的,会受到很(hěn)多(duō)因素影响,在除菌操作中更要注意这一点。
 

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